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lalery
Nuovo Arrivato

22 Messaggi

Inserito il - 27 febbraio 2008 : 16:51:06

Ciao a tutti,
abbiamo riscontrato dei problemi dopo il blocco dei siti aspecifici con BSA.

L'anticorpo utilizzato � un anti-fosfotirosina biotinilato a cui, successivamente, si lega anti-biotina coniugato con HRP che reagisce con la soluzione chemioluminescente. Beh, al termine dello sviluppo il background � spaventoso.

Ma la cosa pi� spaventosa � che ttengo le stesse bande e lo stesso background anche incubando solamente con un secondario anti-mouse...

Non so darmi una spiegazione plausibile, a meno di una BSA contaminata...

AIUTOOOOOOOOOOO!

Grazie.

Iside
Utente Attivo

Citt�: Napoli

1375 Messaggi

Inserito il - 27 febbraio 2008 : 17:17:07

puoi provare a bloccare in non fat dried milk al 5% in TBST 1X per 45' a 4�C.

...we're just two lost souls swimming in a fishbawl...year after year...

lalery
Nuovo Arrivato

22 Messaggi

Inserito il - 27 febbraio 2008 : 17:33:55

Grazie, � proprio quello che sto facendo ora...
Speriamo in bene.

Ciao ciao