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Discussione

ross86
Nuovo Arrivato

Prov.: Ferrara
Citt�: ferrara

20 Messaggi

Inserito il - 06 giugno 2008 : 21:55:06

ciao ragazzi. scusate la mia ignoranza ho iniziato il tirocinio da poco della triennale di biologia e non so fare una fava. potreste per favore spiegarmi cosa vuol dire preparare il latte al 5% ? scusate so che questa � una domanda stupida ma help please.... grazie mille a tutti

Schuldiner86
Utente Junior

Prov.: Viterbo
Citt�: Bologna

581 Messaggi

Inserito il - 06 giugno 2008 : 21:59:51

Di solito lo fai per l'incubazione dell'anticorpo in un Western Blot...Una soluzione al 5% milk significa una soluzione di TBS Tween contenente il 5% di latte in polvere senza grassi, cio� ad esempio in 1l di TBST 5g di latte...Per il primario mi sembra si usi 5% milk, 3% BSA, la BSA serve a saturare tutti i siti di legame sulla membrana per impedire un legame aspecifico dell'anticorpo primario...

domi84
Moderatore

Citt�: Glasgow

1724 Messaggi

Inserito il - 07 giugno 2008 : 00:54:16

Noi il 5% lo facciamo 5g in 100 ml di TBST. Il 5% lo usiamo per il blocking, le proteine del latte bloccano i siti sulla membrana. 2,5% invece quando si deve aggiungere anticorpi primari o secondari...

Il mio blog: http://domi84.blogspot.com/
Le foto che ho scattato...

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 07 giugno 2008 : 01:22:35

Confermo 5% = 5g in 100ml

In realt� la cosa � tecnicamente non correttissima.
Si dovrebbe parlare di 5% p/p o 5% p/v o 5% v/v (p=peso e v=volume)

quindi 5% p/p = 5g in 100 mg che poi per l'acqua equivalgono a 100 ml. Il TBS o altre soluzioni hanno una densit� > dell'acqua, quindi IN TEORIA 1ml > 1g, ma in pratica la differenza � pi� che trascurabile :)

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