Protocollo - Congelamento Ceppi Batterici

Congelamento Ceppi Batterici

Descrizione

I batteri possono essere conservati per molti anni in LB contenente il 15% di glicerolo a basse temperature senza una significante letalità.

Inoculare 5-10 ml di medium con il corrispondente antibiotico da una singola colonia e far crescere O.N.

Trasferire 0.85 ml della coltura O.N. in una vial sterile ed aggiungere 0.15 ml di
Glicerolo al 100% sterile. Agitare bene per mescolare il Glicerolo e la coltura.

Congelare immergendo le provette in Azoto liquido (o in ghiaccio secco ed Etanolo)
Trasferire a –80°C.

I batteri possono essre scongelati dalla vial semplicemente prelevando con una ansa
sterile un po' di glicerinato, evitando però che la vial si scongeli.

Consiglio

Le cellule possono anche essere congelate in DMSO 8% finale