Congelamento di neurosfere

Descrizione

Questo protocollo una guida al congelamento di neurosfere.

- Prelievo neurosfere

- Dopo il prelievo e la centrifugazione, il pellet contenente le neurosfere viene risospeso in un terreno di congelamento cos costituito (per 100 ml):

DMEM/F12 in rapporto 1:1 (42,75 ml + 42,75 ml)
Glucosio 30% (2 ml)
HEPES (0,5 ml)
Neurocult supplements (10 ml)
Penicillina/Streptamicina (1 ml)
Glutammina (1 ml)
DMSO (15 ml)

- La soluzione viene poi aliquotata in criovials da 1,5 ml e poste a -20C per 2 ore.

- Successivamente le vials si passano a -80C over-night e il giorno dopo in azoto liquido.