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emi24
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40 Messaggi |
 Inserito il - 13 giugno 2010 : 15:18:29
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Ciao a tutti,
vi pongo alcune domande:
1)è giusto dire che per la FISH la sonda deve essere di almeno 15KB per vedere il segnale? Quindi non potrei usare il prodotto di una comune PCR?
2)oltre ai comuni BAC con capacita' di inserto di 100-150 KB, si possono usare anche i plasmidi con capacita' di inserto di 10 KB? Se si, i plasmidi si usano su cromosomi metafasici o su altro DNA, tipo nuclei interfasici o fiber-fish?
3) quando uso come sonde le WCP ad esempio ottenute da flow-sorting i passaggi da seguire sono:
* selezionare tramite FACS i cromosomi;
* fare una DOP-PCR,
* marcare gli amplificati con nick translation;
*denaturare i frammenti di PCR marcati e ibridarli su vetrino.
vi ringrazio
ciaooo
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sonde FISH
