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netbridge85
Nuovo Arrivato
Prov.: Milano
Città: Milano
79 Messaggi |
 Inserito il - 02 maggio 2011 : 20:29:21
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Non ho capito se per far esprimere un cDNA, posso usare sia batteri, sia lieviti sia cellule di mammifero. E se per farlo esprimere in cellule di mammifero devo aggiungere una cassetta di espressione al plasmide o all'inserto stesso. come faccio a far esprimere un plasmide ad una cellula di mammifero? per me è impossibile
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Se ti tramuti in qualcosa di più di un semplice uomo, se consacri te stesso a un ideale e se nessuno riesce a fermarti allora diventerai una leggenda! |
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0barra1
Utente Senior
Città: Paris, VIIème arrondissement
3847 Messaggi |
Inserito il - 02 maggio 2011 : 20:57:49
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Ti serve una ORC appositamente per la replicazione del plasmide in mammifero, anziché per batteri. Nulla vieta che il replicone possieda entrambe, contemporaneamente.
E ovviamente necessiterai di un promotore forte a monte del gene da esprimere. |
So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss
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SpemannOrganizer
Utente
Città: Los Angeles
955 Messaggi |
Inserito il - 02 maggio 2011 : 21:43:28
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| Oltre che a una polyA signal sequence, cioè una sequenza che induce la terminazione del trascritto e funge da segnale per l'aggiunta della polyA. Spesso, ma nn sempre, tali vettori di espressione per mammifero (in generale per vertebrati) contengono una kozak sequence per aumentare l'efficienza di traduzione del messaggero nonchè un introne con siti di splicing. |
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Martin.diagnostica
Utente Attivo
1582 Messaggi |
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Discussione |
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espressione di cDNA in cellule di mammifero
Didattica
