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elenaimo
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12 Messaggi

Inserito il - 14 settembre 2011 : 09:29:01  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di elenaimo Invia a elenaimo un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
qualcuno gentilmente potrebbe spiegarmi come si usa per capire se il frammento di dna è stato integrato dal vettore...ho un pò di confusione...grazie mille!

Geeko
Utente

Ctenophor1.0

Città: Milano


1043 Messaggi

Inserito il - 14 settembre 2011 : 09:40:35  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Geeko Invia a Geeko un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Se il DNA è stato integrato correttamente, questo si sarà inserito all'interno del polylinker che era stato messo in registro di lettura col gene Z per la beta-galattosidasi. Ebbene, se questo succede, quel gene verrà interrotto dall'inserto, e quindi il batterio con quel plasmide non esprime la beta-galattosidasi.
Se poi al mezzo di coltura aggiungi il composto X-gal (che è analogamente al lattosio specifico per la beta-galattosidasi) questo se viene idrolizzato genera in composto colorato di blu.
E X-gal verrà idrolizzato solo dalle colonie che hanno la beta-galattosidasi, e quindi il gene per questo enzima integro (questo implica che non hanno ricevuto l'inserto). Quindi le colonie che si coloreranno di blu, non hanno il nostro inserto, mentre quelle che rimangono bianche, sono quelle d'interesse.
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elenaimo
Nuovo Arrivato



12 Messaggi

Inserito il - 14 settembre 2011 : 13:51:58  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di elenaimo Invia a elenaimo un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
grazie!
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