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Autore

Discussione

samuash
Nuovo Arrivato

2 Messaggi

Inserito il - 27 aprile 2015 : 11:56:10

Ciao ragazzi,
non riesco a capire perchè contando le cellule ne conto sempre molto, molto meno di quanto ce ne siano in effetti in coltura. Quale potrebbero essere i problemi? questo mi crea problemi con la programmazione degli esperimenti perchè magari splitto sapendo di aver piastrato 300 mila cellule e invece dopo due giorni sono già a confluenza. Daltrocanto spesso anche visivamente la conta non è coerente con il pellet o con il numero di cellule osservate al microscopio prima di staccarle.

Conto in camera di Burker con trypan 1:1

la formula che applico è

num. di cellule tot./3 (quadranti) X 2 (fatt. diluizione) X 10.000

Grazie dell'aiuto

chick80
Moderatore

Città: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 27 aprile 2015 : 16:49:21

Prima di mettere le cellule nella camera di Burker assicurati di mischiare bene la soluzione (es. pipettando un po' di volte). Le cellule precipitano velocemente verso il fondo e quindi rischi di sottostimare la conta.

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