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riti89
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2 Messaggi

Inserito il - 23 marzo 2022 : 20:00:11  Mostra Profilo Invia a riti89 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti!
Ho da poco iniziato il tirocinio in laboratorio, quindi abbiate pieta' della mia ignoranza!
Mi trovo in difficolta' con la comprensione del fattore di diluizione. Ho preso appunti con ciò' che mi veniva detto, ma fatico a dare un senso al tutto, mi aiutereste?

Nel mio esperimento ho 449.000 cellule/ml, ma voglio averne 4000 su 100 microlitro, quindi in pratica 40.000/ml.
Mi hanno detto di fare 449.000/40.000=11,2 che rappresenta il mio fattore di diluizione e fin qui ok.
Il volume totale che voglio usare per seminare tutti i pozzetti della mia piastra e' 14 mL.
Quindi mi hanno detto di fare 14/11,2=1,24 (e già' qui non capisco il perche').
Poi 14-1,24=12,76
In pratica dovrei quindi creare una falkon che contenga 1,24 ml di cellule e 12,76 di medium, da cui poi prelevo 100 microlitri da seminare in ogni pozzetto.

In alternativa 449.000/40.000=11,2, poi 14/11,2=1,24
e (1+10,2)x1,24= 1,24 ml di cellule e 12,67 di medium...

Qualcuno riesce ad aiutarmi? Grazie mille, mi salvereste!!

sofychan
Nuovo Arrivato



101 Messaggi

Inserito il - 24 marzo 2022 : 07:51:00  Mostra Profilo Invia a sofychan un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao,

Quindi mi hanno detto di fare 14/11,2=1,24 (e già' qui non capisco il perche'). -> perchè sai qual è il volume finale (14 mL) e quanto è il fattore di diluizione che devi applicare per avere la concentrazione finale che cerchi, nel volume finale. Spero sia chiaro, è un conto abbastanza spartano... O in alternativa puoi pensarla applicando C1xV1 = C2xV2, dove C1= 449000, V1=il volume da prelevare, che devi calcolare, C2=40000, V2= 14 mL.

Poi 14-1,24=12,76
In pratica dovrei quindi creare una falkon che contenga 1,24 ml di cellule e 12,76 di medium, da cui poi prelevo 100 microlitri da seminare in ogni pozzetto. -> corretto

In alternativa 449.000/40.000=11,2, poi 14/11,2=1,24
e (1+10,2)x1,24= 1,24 ml di cellule e 12,67 di medium... -> non capisco bene il senso di questo calcolo, tra l'altro il risultato non è corretto
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