SE HO UNA QUANTITA MOLTO PICCOLA DI DNA GENOMICO DA AMPLIFICARE DEVO AUMENTARE I CICLI ? ESISTE IN COMMERCIO QUALCOSA CHE MI AMPLIFICA IL GENOMA? CIAO A TUTTI
Ciao! Dipende da quanto tene serve e cose ne vuoi fare. Aumentando il numero dei cicli aumenta il numero di copie di DNA prodotto e quindi i grammi di DNA finale....però la PCR normale non è una tecnica quantitativa, quindi non sai mai la quantità esatta in grammi di DNA formato dopo un tot di cicli....l'unico modo è fare una PCR quantitativa, così controlli la quantità di DNA formato dopo ogni ciclo e fermi la PCR quando hai raggiunto la quantità desiderata....anche se in laboratorio finisci per usare sempre lo stesso protocollo e aggiustarlo sperimentalmente secondo i casi. Il genoma in blocco unico non è amplificabile...almeno non con mezzi simil PCR. Se ti serve tanto genoma prendi tante cellule e fai l'estrazione del DNA....credo che sia l'unico modo... spero di essetti stato utile ciao ciao
il genoma in toto E' AMPLIFICABILE! vai un po' sul sito Amersham e troverai cio' che ti serve...poi ti consiglio una buona messa a punto elettronica (ci sono softwares molto forti in rete e gratuiti) e tecnica della tua PCR, prima di aumentare i cicli oltre i trenta. Ultimo consiglio, Taq Gold dell'Applied Biosystems a me ha risolto parecchi problemi.
Questa del genoma amplificabile non la sapevo....belli questi kit....un pò costosi....deve essere per questo che noi ste cose non si sono mai viste.....abbiamo 1 pcr per 1 intero laboratorio e la RT-pcr la prendiamo in prestito dal lab vicino....meravigliose sovvensioni statali! Ma pèer cosa si usa l'intera amplificazione del genoma....perchè per esempio in campo diagnostico\medico le grandi amplificazioni sono sconsigliate! ciao ciao