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morgan79
Utente Junior
Prov.: Bari
143 Messaggi |
 Inserito il - 15 novembre 2007 : 21:31:24
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Mi sto affacciando per la prima volta all'RNA interference, e nel frattempo che arrivino gli oligo che ho disegnato per gli siRNA e le cellule per fare le particelle virali. volevo risolvere alcuni dubbi;
i vettori lentivirali sono ad integrazione oppure sono ad espressione solo transiente?
Per disegnare gli oligo sono ricorso ad un sistema che a mio avviso qualche criterio ce l'aveva, ma qualcuno di senz'altro maggiore esperienza ha da darmi qualche consiglio?
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il sapere non è sufficiente, bisogna applicare; il volere non è sufficiente, bisogna fare |
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Luca-DNA
Nuovo Arrivato
Prov.: Torino
Città: Torino
68 Messaggi |
 Inserito il - 16 novembre 2007 : 01:05:51
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| Tendenzialmente utilizzi i vettori lentivirali proprio per produrre virus in modo tale da ottenere un'espressione stabile del siRNA (o di qualsiasi altro transgene), poichè questo si integra nel genoma della cellula infettata...però i vettori si possono anche utilizzare in modo transiente mediante trasfezione di questi nelle cellule! |
A scientific man ought to have no wishes, no affections, - a mere heart of stone. (C. Darwin) |
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morgan79
Utente Junior
Prov.: Bari
143 Messaggi |
Inserito il - 16 novembre 2007 : 06:17:55
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| e quali sono le condizioni che determinano l'integrazione o la modalita transiente se ci sono?? hai qualche pubblicazione da farmi leggere su questo? |
il sapere non è sufficiente, bisogna applicare; il volere non è sufficiente, bisogna fare |
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Luca-DNA
Nuovo Arrivato
Prov.: Torino
Città: Torino
68 Messaggi |
Inserito il - 16 novembre 2007 : 18:19:19
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Se produci i virus ed infetti le cellule ottieni un'espressione stabile mediante integrazione nel genoma del vettore contenente il siRNA...
Invece se trasfetti le cellule (es. metodo di lipofectamina) ottieni un'espressione transiente che in genere ha il picco di efficacia del siRNA 2-3 giorni dopo la trasfezione... |
A scientific man ought to have no wishes, no affections, - a mere heart of stone. (C. Darwin) |
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RNA interference
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