salve ragazzi! sto studiando molecolare... ma il walking on the chromosome proprio non l'ho capito!!! sia quello classico che quello modificato: potete aiutarmi??? grazie, baci e tanti auguri di buone feste
Innanzitutto devi partire da una genoteca genomica costruita mediante tagli casuali (es doppia digestione parziale) perchè sicuramente genererai dei frammenti di restrizione parzialmente sovrapponibili. Ora isolando un clone dalla genoteca ti costruisci una sonda marcata corrispondente all'estremità del tuo frammento. Dopodichè utilizzi questa sonda per cercare il frammento,che nel genoma di partenza era adiacente al 1. La tua sonda,infatti, si anniderà sul frammento parzialmente sovrapponibile al 1.Ottenuto il 2 pezzo ti costruisci sempre una sonda dell'estremità e ripeti i passaggi. Questa è la metodica classica..quella modificata non la conosco. Ti consiglio il testo dna ricombinante.