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 Funzione del DTT in sintesi di cDNA
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Biotecgen
Utente Junior

Città: Napoli


191 Messaggi

Inserito il - 09 marzo 2009 : 19:50:01  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Biotecgen Invia a Biotecgen un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ragà scusatemi, na curiosità
ma nella sintesi del cDNA il DTT ovvero ditiotreitolo funge da antiossidante semplicemente?
Grazie

non esistono domande indiscrete...le risposte a volte lo sono.

GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8396 Messaggi

Inserito il - 09 marzo 2009 : 20:21:57  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Più che PCR sarebbe RT!

Comunque il DTT viene utilizzato nelle reazioni di retrotrascrizione appunto come agente riducente, riduce i ponti disolfuro e "stabilizza" le retrotrascrittasi (non c'entra niente la struttura secondaria dell'RNA come a volte si trova scritto, visto che l'RNA non fa ponti disolfuro).

In realtà però l'utilizzo del DTT nelle reazioni di retrotrascrizione è molto discusso, ci sono molti articoli dove si dice che eliminando il DTT dalla reazione di retrotrascrizione si ottiene più cDNA, ed es. questo: Quantitative Transcript Analysis in Plants: Improved First-strand cDNA Synthesis (non so se sia free, ma presumo di no!)

No appunto non è free, questo è il link di Pubmed: Quantitative transcript analysis in plants: improved first-strand cDNA synthesis.
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Biotecgen
Utente Junior

Città: Napoli


191 Messaggi

Inserito il - 11 marzo 2009 : 18:47:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Biotecgen Invia a Biotecgen un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
non potevi essere più esaustiva
grazie 1000 Pina

non esistono domande indiscrete...le risposte a volte lo sono.
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Dionysos
Moderatore

D

Città: Heidelberg


1913 Messaggi

Inserito il - 11 marzo 2009 : 21:39:11  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Dionysos  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Dionysos Invia a Dionysos un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Zia pina, in una ricerchina che feci tempo addietro
ricordo che trovai pure che stabilizza indirettamente
l'RNA perchè figura come inibitore delle RNAasi.

Ti risulta?

Volere libera : questa é la vera dottrina della volontà e della libertà
(F.W. Nietzsche)

Less Jim Morrison, more Sean Morrison!


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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8396 Messaggi

Inserito il - 11 marzo 2009 : 21:56:02  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da Dionysos

Zia pina, in una ricerchina che feci tempo addietro
ricordo che trovai pure che stabilizza indirettamente
l'RNA perchè figura come inibitore delle RNAasi.

Ti risulta?

In realtà non è proprio così, l'effetto è lo stesso che ha sulla retrotrascrittasi ovvero mantiene l'attività enzimatica degli inibitori delle RNasi prevenendo la loro ossidazione.
Come dicevo qui esistono anche inibitori delle RNasi che non necessitano di DTT.

... ma la finite di chiamarmi Pina???
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 11 marzo 2009 : 22:00:13  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Giuliano ti dà anche della zia...

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GFPina
Moderatore

GFPina

Città: Milano


8396 Messaggi

Inserito il - 11 marzo 2009 : 22:10:38  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di GFPina  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di GFPina Invia a GFPina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Citazione:
Messaggio inserito da chick80

Giuliano ti dà anche della zia...

Veramente è Dionysos!!!
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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 11 marzo 2009 : 22:40:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
doh

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