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suomi 06
Nuovo Arrivato

1 Messaggi

Inserito il - 11 ottobre 2006 : 16:10:25

dopo aver isolato e purificato i miei mitocondri attraverso il metodo Bradford(simpatico amico)ottengo la concentrazione di proteine nel mio mitocondrio intatto e rotto...qualcuno,per�,pu� aiutarmi a capire come si calcola la concentrazione delle proteine dei miei campioni!!???? per esempio io ho conc.0,6627 abs.0,057 e il volume delle mie proteine � di 50microlitri....aiutooooo, please!!!ke devo fare...con tutti questi numeri?

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 11 ottobre 2006 : 21:44:41

Devi fare una retta di taratura innanzitutto!

Fai degli standard di albumina e leggili allo spettrofotometro (questa cosa la devi rifare x ogni nuovo esperimento) per costruirti una retta di riferimento.

Leggi anche questi topic:
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=1144
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=1378
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=740

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Black Mamba
Nuovo Arrivato

Citt�: Roma

24 Messaggi

Inserito il - 10 aprile 2007 : 15:25:35

OPPURE PUOI USARE IL METODO DI bradford!!!!

Schuldiner86
Utente Junior

Prov.: Viterbo
Citt�: Bologna

581 Messaggi

Inserito il - 10 aprile 2007 : 15:40:37

Col metodo di Bradford ci costruisci la retta di taratura con l'albumina sierica bovina, e poi ci misuri l'assorbanza dei tuoi campioni e trovi la concentrazione...Altrimenti potresti usare la legge di Lambert Beer per conoscere la concentrazione del campione, se conosci il coefficiente di estinzione molare dello spettrofotometro e la lunghezza della cuvetta con c=A/(el)...