Salve Sono uno studente alle prese con la sua tesi di laurea, premetto che non ho molte nozioni sulla PCR e mi scuso se la domanda potrebbe risultare banale.
Ho un problema nell'interpretazione della delta delta ct.
Semplificando il tutto vi chiedo:
Ho il gene x (non trattato)con un valore delta delta ct = 1 Ho il gene x (trattato) con un valore delta delta ct = 0,30
Considerando questi valori di delta delta ct, quali di questi geni si sarà espresso di più?
Si si!!! Effettivamente quelli che ho riportato sono i valori ricavati dalla 2^ -DDCt.
Il link che mi hai postato lo avevo già letto e mi è stato molto utile anche se non riesco ancora ad orientarmi nell'interpretazione dei dati. Quindi: Ho il gene x (non trattato)con un valore 2^ -DDCt= 1 Ho il gene x (trattato) con un valore 2^ -DDCt= 0,30
Il gene x in quale situazione risulta espresso di più?
Grazie e scusate ancora per le banalità ma questo non è proprio il mio campo.
Il gene X in questo caso è più espresso nel controllo. Questo perchè DDCt = 0 per il controllo (ovviamente) e ~1.7 nel trattato ( log2(0.30) ) Ciò vuol dire che DCt del trattato è > di DCt del controllo. Siccome il DCt è il Ct del gene X - Ct dello standard interno (es. 18s) questo vuol dire che nel trattato il Ct del gene X è più grande rispetto al controllo (assumendo che i Ct del 18s siano simili). Siccome il Ct è inversamente correlato alla quantità di gene (meno ce n'è più alto è il Ct perchè ci vogliono più cicli per amplificarlo) vuol dire che nel controllo c'è meno gene X.
Siccome il Ct è inversamente correlato alla quantità di gene (meno ce n'è più alto è il Ct perchè ci vogliono più cicli per amplificarlo) vuol dire che nel trattato c'è meno gene X.