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alej88
Nuovo Arrivato

14 Messaggi

Inserito il - 12 marzo 2009 : 21:58:23

ciao a tutti.
oggi a laboratorio dovevamo calcolare la concentrazione proteica tramite il metodo di bradford:
la retta di taratura a BSA
2,5
5
7,5 da quello k ho capito mg/ml
come asssorbanza rispettivamente
0.110
0.264
0.394
prima domanda : adesso questi li metto in grafico con concentrazione sulle x , e assorbanza sulle y senza fare calcoli riportando soltanto i punti ? l'insieme d questi tre punti costituisce la retta?

seconda parte
poi ho preparato i campioni per determinare la concentrazione dei lisati facendone 6 e in ognuno d questi 2 microlitri di lisato
con assorbanza
1: 0.088
2: 0.125
3: 0.096
4: 0.083
5: 0.075
6: 0.118
A questo punto mi manca la concentrazione della proteina come la calcolo?

(mi scuso per le domande )

chick80
Moderatore

Citt�: Edinburgh

11491 Messaggi

Inserito il - 12 marzo 2009 : 22:11:03

Citazione:
adesso questi li metto in grafico con concentrazione sulle x , e assorbanza sulle y senza fare calcoli riportando soltanto i punti ?

Esatto!

Citazione:
l'insieme d questi tre punti costituisce la retta?

No! Non � necessariamente vero che i tre punti siano allineati.
Devi fare una regressione lineare (es. con il metodo dei minimi quadrati) per trovare la retta.

Citazione:
A questo punto mi manca la concentrazione della proteina come la calcolo?

Una volta avuta l'equazione della retta: y=mx+q ovvero A = mC + q, saranno noti m e q (dall'equazione) e A (le letture che hai fatto), quindi puoi ricavare C.

Lo puoi fare anche graficamente se ti serve una concentrazione approssimativa, guardando a che x corrisponde una y uguale all'assorbanza letta.

Vedi anche:
http://www.molecularlab.it/forum/topic.asp?TOPIC_ID=1378

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alej88
Nuovo Arrivato

14 Messaggi

Inserito il - 12 marzo 2009 : 22:58:49

grazie adesso devo solo ricordare il metodo dei minimi quadrati...

mattia.dinunzio
Nuovo Arrivato

116 Messaggi

Inserito il - 13 marzo 2009 : 08:59:40

quando ingrafichi su excell te lo fa lui. basta cliccare col tasto desto nel grafico e mettere, se ricordo bene, aggiungi linea di tentenda chiedendo anche di inserire l'equazione della retta

alej88
Nuovo Arrivato

14 Messaggi

Inserito il - 13 marzo 2009 : 22:59:36

grazie mille....infatti oggi hokiesto all'assistente di laboratorio e ha detto di fare una cosa molto pi� grezza..cio� metodo grafico...certo che se non spiegano...grazie mille comunque..mi � stato molto utile per capire meglio tutto il procedimento

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