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prettyshine
Nuovo Arrivato

Città: Napoli


75 Messaggi

Inserito il - 13 giugno 2012 : 11:06:55  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di prettyshine Invia a prettyshine un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ragazzi buongiorno, sto studiando per un esame di biochimica delle fermentazioni e non mi è molto chiaro la prooduzione dell'insulina ricombinante da parte del lievito...ovviamente il processo comincia cn lo scegliere il gene di interesse, spesso umano, adattarlo sul vettore di espressione e inglobarlo nella cellula, in qst caso il lievito, attraverso clonazione o integrazione genica. una volta fatto questo le cellule di lievito crescono in un fermentatore e sono poi centrifugate per recuperare l'insulina prodotta. il centrifugato viene sottoposto a cromatografia a scambio cationico e a ph acidi si avrà la separazione dell'insulina sulla fase stazionaria mentre a ph basici verrà eluita. una volta eluita sarà filtrata x eliminare dei contaminanti, isolata e ci sarà precipitazione cn etanolo. a questo punto si filtra di nuovo il composto e avrà una purezza del 90%; questo valore nn è ancora sufficiente e quindi avremo una transpeptidazione e cioè sostituzione del transpeptide sulla catena esterea cn una treonina B30, successiva elettroforesi, diversi cicli di HPLC e infine filtrazione e liofilizzazione fino ad arrivare alla insulina umana cn una purezza > al 99.5%..l'insulina nel lievito ha 3 aa al posto del peptide C e la sua sintesi prevede la formazione di una sola catena, a differenza dell'E.coli in cui si formano le catene A e B..

è giusto? vi prego datemi una mano, ho l'esame lunedì e ho questo dubbio..grazie mille a tutti coloro ke risponderanno..

prettyshine
Nuovo Arrivato

Città: Napoli


75 Messaggi

Inserito il - 14 giugno 2012 : 17:26:02  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di prettyshine Invia a prettyshine un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
per cortesia qualcun mi può aiutare? :(
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Giuliano652
Moderatore

profilo

Prov.: Brescia


6812 Messaggi

Inserito il - 14 giugno 2012 : 17:39:25  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Giuliano652 Invia a Giuliano652 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
sorry ma non ne so niente, mai studiato il processo

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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 14 giugno 2012 : 18:04:42  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Neppure io, magari qualcuno di biotech...

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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Patrizio
Moderatore

mago

Città: Vancouver


1899 Messaggi

Inserito il - 14 giugno 2012 : 18:09:10  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Patrizio  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Patrizio Invia a Patrizio un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
http://w3.ualg.pt/~jvarela/biotecnol/pdf/humaninsulin.pdf

dovrebbe contenere quello che cerchi


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prettyshine
Nuovo Arrivato

Città: Napoli


75 Messaggi

Inserito il - 19 giugno 2012 : 07:15:16  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di prettyshine Invia a prettyshine un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
grazie mille a tutti =)
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