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tweety
Nuovo Arrivato


Città: pescara-chieti


10 Messaggi

Inserito il - 18 marzo 2007 : 16:01:25  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di tweety Invia a tweety un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ciao a tutti,potete darmi qualche info su questa tecnica?grazie mille

Giuliano652
Moderatore

profilo

Prov.: Brescia


6941 Messaggi

Inserito il - 19 marzo 2007 : 10:27:00  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Giuliano652 Invia a Giuliano652 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
La Chromatin Immunoprecipitation (o ChIP) è una tecnica mediante la quale si riesce a rilevare l'effettivo legame di un qualunque fattore di trascrizione al DNA. Detta in maniera molto semplicistica: si stimolano le cellule in qualche maniera, dopo la stimolazione si vuole studiare la cinetica di legame di un determinato fdt al DNA, non si fa altro che, a vari tempi, fissare le cellule, estrarre il DNA nucleare, frammentarlo (io l'ho fatto con sonicazione),fare un'immunoprecipitazione con un anticorpo legante il nostro fdt per selezionare il frammento di DNA legato ad esso, separare la parte proteica dal DNA, fare una PCR per amplificare il frammento e fare un gel di agarosio per evidenziare i risultati. Più la banda è intensa, più frammenti hai per quel punto, quindi vuol dire che c'era più proteina legata al DNA. Se non hai bande per uno o più punti temporali vuol dire che a quel tempo il fdt non legava il DNA.

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