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Tag   moi    infezione virale    laboratorio  Aggiungi Tag

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CheshireCat91
Nuovo Arrivato



1 Messaggi

Inserito il - 31 ottobre 2017 : 10:16:01  Mostra Profilo Invia a CheshireCat91 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Salve a tutti,
sono una new entry.
A gennaio devo laurearmi devo eseguire degli esperimenti infettando delle colture cellulari con una MOI di 2.
Per contare le quante cellule per ml ho, uso un cell counter e del trypan blue. Ora, sapendo il numero di cellule per ml ( mettiamo ad esempio che ne abbia 5.43 x 10 alla sesta cells/ml)quanto virus devo mettere per infettare le fiasche, sapendo che il titolo virale è di 10 alla sesta?
( ho eseguito la titolazione con il METODO DELLA DILUIZIONE LIMITE).
Vi sarei molto grata se mi deste una mano perchè sono disperata...
poichè è da poco che frequento il laboratorio, vi chiedo di spiegare nella maniera più chiara possibile e guidandomi passo per passo.
Grazie a tutti quelli che risponderanno.
Un abbraccio, M.

Giuliano652
Moderatore

profilo

Prov.: Brescia


6561 Messaggi

Inserito il - 31 ottobre 2017 : 10:51:59  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Giuliano652  Clicca per vedere l'indirizzo MSN di Giuliano652 Invia a Giuliano652 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
sono parecchio arrugginito sulle tecniche di lab, ma se non sbaglio una MOI di 2 vuol dire che devi usare due virioni per cellula, quindi se hai 5.43 x 10^6 cellule dovrai infettare con 1.09 x 10^7 virus (5.43 x 2 = 10.86)... quindi direi che devi trovare il modo di avere più virus per ml oppure diluire le cellule di almeno un fattore di 100, in modo da poter avere virus sovrabbondante, a quel punto ti servirebbero solo 1.09 x 10^5 virioni per 5.43 x 10^4 cellule

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