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Biso
Nuovo Arrivato

0221_da_Luis 22
Città: Belluno


9 Messaggi

Inserito il - 26 aprile 2007 : 11:13:36  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Biso Invia a Biso un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti! Mi sto accingendo ad iniziare la tecnica dell'immunofluorescenza che non ho mai svolto prima! Tra i numerosi dubbi che mi affiorano mettendo a punto il protocollo , uno mi preoccupa di più perchè ho ricevuto risposte contrastanti: per fissare le cellule è meglio usare la paraformaldeide in polvere o la formaldeide in soluzione al 37%?
Inoltre mi sapreste indicare il metodo migliore per poter maneggiare la PFA in polvere in sicurezza (preparando soluzioni in PBS al 4% per esempio) tenendo conto che la bilancia di precisione, il bagnetto e la piastra magnetica riscaldante non solo li ho fuori cappa chimica, ma in una stanza diversa da quella dove si trova la cappa stessa?
Grazie per il vostro aiuto!

Giuliano652
Moderatore

profilo

Prov.: Brescia


6924 Messaggi

Inserito il - 26 aprile 2007 : 11:39:17  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Giuliano652 Invia a Giuliano652 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
per il protocollo non so aiutarti, per la preparazione prova a controllare le frasi di rischio e sicurezza (frasi R e S) che sono sulla confezione della PFA. In tutti i modi credo che una mascherina, guanti e camice siano il minimo.

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chick80
Moderatore

DNA

Città: Edinburgh


11491 Messaggi

Inserito il - 26 aprile 2007 : 13:07:02  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di chick80 Invia a chick80 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Noi usiamo PF in granulato che è meglio della polvere, perchè è meno volatile. La soluzione dovrebbe andar bene lo stesso, non credo cambi nulla (forse costa di più?).
Per la sicurezza, usa sempre una mascherina quando la pesi, se ce l'hai sotto cappa non ci dovrebbero essere problemi.
Un trucchetto per preparare la soluzione di PF è di usare PBS 3x o 4x o cmq concentrato. Metti la PF nell'acqua con un po' di NaOH così si scioglie abbastanza velocemente e poi aggiungi il PBS concentrato.
In questo modo è molto più facile scioglierla, perchè se la metti direttamente nel PBS ci mette i secoli...

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Biso
Nuovo Arrivato

0221_da_Luis 22

Città: Belluno


9 Messaggi

Inserito il - 27 aprile 2007 : 10:43:54  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Biso Invia a Biso un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Grazie per i consigli e per i suggerimenti!
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elly_
Utente Junior

brain blu



400 Messaggi

Inserito il - 02 maggio 2007 : 09:54:10  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di elly_ Invia a elly_ un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Io uso PARAFA 4% in PBS per 10 minuti. Io ce l'ho liquida e da' degli ottimi risultati ciao!
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