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sciurella
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5 Messaggi |
 Inserito il - 09 dicembre 2008 : 23:21:07
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Ciao! Qualcuno di voi mi sa spiegare meglio dela diapositiva del mio prof ( )come si effettua la titolazione di una sospensione virale e quindi la conta delle UFP (unità formanti placca)??
Sembra una cosa tipo la conta batterica per diluizione e piastramento ma come è passo per passo?
Vi ringrazio molto.
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Giuliano652
Moderatore
Prov.: Brescia
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sciurella
Nuovo Arrivato
5 Messaggi |
 Inserito il - 10 dicembre 2008 : 10:24:44
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Scusa ma non sono molto pratica, spero di aver inserito bene il file 
Allegato:  doc1.doc
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Giuliano652
Moderatore
Prov.: Brescia
6940 Messaggi |
Inserito il - 10 dicembre 2008 : 10:59:56
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Provo a spiegarti la figura
Prima di tutto la figura con sfondo nero. Vengono mostrate delle eppendorf, si parte dalla eppendorf in cui c'è il virus a concentrazione ignota e si fanno delle diluizioni seriali: la prima 1:100 e poi partendo da lì si va avanti 1:10: nella pratica, da 1 ml di madre si prendono 10 microlitri (ul) e si mettono in una eppendorf con 1 ml di terreno (dovrebbero essere 990 ul, ma la differenza è irrisoria, quindi va bene anche 1 ml), da qui si prendono 100 ul e si mettono in una terza eppendorf che contiene 900 ul di terreno, così anche per la successiva fino ad arrivare alla concentrazione di 10^-7.
Ogni eppendorf ora contiene virus in quantità diversa per un fattore dieci l'una dall'altra. Il terreno contenente questo virus ora viene usato per piastare le cellule che dovranno essere infettate: ad ogni concentrazione di virus corrisponde una quantità di placche sul tappeto di cellule. Se il virus è troppo il monostrato viene completamente distrutto (infatti sono raffigurate delle piastre completamente bianche), diminuendo la quantità di virus piano piano le cellule resistono di più e si possono distinguere le placche.
La figura a fianco mostra il risultato di una titolazione per placche a temperature diverse e con o senza inibitore del virus.
Per titolare, infine, il virus, è semplice: a 10^-5 l'esempio mostra 100 placche, a 10^-6 ne mostra 10, a 10^-7 ne mostra una. I numeri sono più o meno equivalenti, infatti se moltiplichi 100x10^5 = 1x10^7, il titolo quindi è 1x10^7 pfu/ml |
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sciurella
Nuovo Arrivato
5 Messaggi |
Inserito il - 10 dicembre 2008 : 18:06:56
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Ti ringrazio molto.. mi sembra una cosa abbastanza simile quindi alla conta batterica con la differenza principale che ci sono delle colture cellulari sulle piastre e non dei terreni acellulari. Sbaglio?
Ti ringrazio molto e spero di risolvere presto dei piccoli problemini che ho con l'inserimento dell'avatar, della firma e delle preferenze nel mio profilo, così da poter partecipare di più..
Ciao  |
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Giuliano652
Moderatore
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Unità formanti Placca
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