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 aiuto calcoli per semina in multiwell
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rorina
Nuovo Arrivato



6 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 16:30:02  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di rorina Invia a rorina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Ciao a tutti,
avrei bisogno di una mano con alcuni calcoli per un esperimento.
devo seminare in multiwell da 96pozzetti 1*10^5 cellule/ml e in particolare 10^4 cellule/well ed in ciascuna well devo avere un volume totale di 100 µL.Ho contato le cellule in coltura: 1.3*10^6 cell/ml..come devo procedere???
help,sono alle prime armi!!!
Grazie

Giuliano652
Moderatore

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Prov.: Brescia


6923 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 16:34:09  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di Giuliano652 Invia a Giuliano652 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
http://www.molecularlab.it/principi/calcoli-laboratorio/concentrazioni.asp
http://www.molecularlab.it/principi/calcoli-laboratorio/diluizioni.asp

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roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


564 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 22:33:08  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Scusate, ma queste cose non si imparano al primo anno in chimica inorganica?
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rorina
Nuovo Arrivato



6 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 22:47:20  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di rorina Invia a rorina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
allora mi scusi per la banale e stupida domanda,"Dottoressa"...
ho precisato di essere alle prime armi....
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roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


564 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 22:50:33  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Non avevo capito fossi alle prime armi con l'università.
Però come vi offendete presto, mammamia!
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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 22:52:56  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Sorvolando su tutte le chiacchiere, sei giunta alla risposta rorina?

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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rorina
Nuovo Arrivato



6 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 22:59:41  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di rorina Invia a rorina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
no, purtroppo non ancora... :( mi perdo ancora tra i problemi di diluizioni etc...devo prendere confidenza con il mondo pratico del laboratorio e quindi per ora non ho questa elasticità mentale nei calcoli...sob...
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0barra1
Utente Senior

Monkey's facepalm

Città: Paris, VIIème arrondissement


3847 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 23:03:20  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di 0barra1 Invia a 0barra1 un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Riporta il tuo ragionamento ed i tuoi calcoli, cercheremo di aiutarti ;)

So, forget Jesus. The stars died so that you could be here today.
A Universe From Nothing, Lawrence Krauss

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roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


564 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 23:05:31  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
Prova a scrivere qual è la tua concentrazione iniziale, quale quella finale e il volume in cui vuoi ottenere tale concentrazione. Può aiutarti a fare un po' di chiarezza, poi posta pure
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rorina
Nuovo Arrivato



6 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 23:28:22  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di rorina Invia a rorina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
ok, vediamo se ragionando con voi arrivo alla risposta...
allora la mia concentrazione iniziale è di 1300000cell/ml, quella finale è (e qui mi incasino)100000cell/ml(?) e il volume finale è 100microlitri
quindi secondo i miei calcoli dovrei prelevare dalla mia flask 7.69 microlitri e metterli in ciascun pozzetto con 92,3 microlitri di mezzo?
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roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


564 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 23:41:05  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
no, hai sbagliato con le conversioni.
allora, la concentrazione iniziale è 1,3 x 10^6 cells/mL, che equivale a 13 x 10^5 cells/mL (130000 cells/mL, non 1300000 come hai scritto); quella finale è 10^5 cells/mL (100000 cells/mL); il volume finale è 100 uL=0,1 mL.
quindi:
(13x10^5 cells/mL) x (X mL) = (10^5 cells/mL) x (0,1 mL)
X = 0,0077 mL = 7,7 uL

quindi prelevi 7,7 uL di sospensione cellulare a concentrazione pari a 1,3 x 10^6 cells/mL e porti a volume con il mezzo
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rorina
Nuovo Arrivato



6 Messaggi

Inserito il - 19 settembre 2012 : 23:51:38  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di rorina Invia a rorina un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
aaaaaah ok, capito! mi sono incasinata da sola con le conversioni...ma almeno ho capito che in termini di "formule" stavo ragionando nel verso giusto!
grazie mille per le delucidazioni!!!:)
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roberta.s
Utente Junior

yeast

Città: Parigi


564 Messaggi

Inserito il - 20 settembre 2012 : 00:02:04  Mostra Profilo  Visita l'Homepage di roberta.s Invia a roberta.s un Messaggio Privato  Rispondi Quotando
di nulla e in bocca al lupo!
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